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这个方法可以快速调试和校准贝克曼流式细胞仪

发布时间:2022-08-28   点击次数:33次
  贝克曼流式细胞仪可用于检测细胞特征,包括细胞大小、细胞数量、细胞周期和细胞表型分析等。该技术可为研究人员提供单个细胞的高度特异性信息。从表达绿色荧光蛋白的细胞系到来源于组织的异质细胞群体,都是典型的流式样品类型。实现高效流式细胞分析的关键要求是将样品制备成单细胞悬液,从而确保每个细胞都能进行数据分析。
 
  流式细胞仪是仪器设备中的生物器械,属于分子生物范畴。目前, 流式细胞仪已广泛应用于:免疫学、生物化学、生物学、肿瘤学以及血液学等方面的研究和临床常规工作。
 
  贝克曼流式细胞仪的三个主要元件是流体学、光学和电子学系统。
  1、贝克曼流式细胞仪的流体系统负责将样品从样品管转移到流动池。一旦通过流动池,样品将被分选出来或移到废液中。
  2、光学系统的元件包括激发光源、透镜和滤光片以及用于产生光电流的检测系统。
  3、电子系统是流式细胞仪的大脑。在这里,来自检测器的光电流经过数字化、处理和保存,以用于后续分析。 
 
  贝克曼流式细胞仪的调试和校准:
  在使用前,甚至在使用过程中都要精心进行调试,以保证工作的可靠性和佳性。调试的项目主要是激光强度、液流速度和测量区的光路等。
  激光强度:除调整反射镜的角度以调整到所需波长的激光出光外,还要结合显示屏上的光谱曲线使激光的强度输出为大。
  液流速度:可通过操作台数字显示监督,调节 气体压力大小以获得稳定的液流速度。
  测量区光路调节:这是调试工作的关键。需要保证在测量区的液流、激光束、90散射测量光电系统垂直正交,而且交点较小。一般可在用标准荧光微球等校准中完成。
  流式细胞术中所测得的量是相对值,因此需要在使用前或使用中对系统进行校准或标定,这样才能通过相对测量获得的意义。
  因而FCM中的校准具有双重功能:仪器的准直调整和定量标度。标准样品应该稳定,有形成份形状应是大小比较一致球形,样品分散性能良好,且经济、容易获得。
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