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美谷分子MD 细胞凋亡早期荧光检测试剂盒

更新时间:2021-07-23

简要描述:

美谷分子MD 细胞凋亡早期荧光检测试剂盒
用于检测细胞早期凋亡;一步法、均相检测活细胞内 GSH 水平。

型号:CMB0415934D点击量:65

美谷分子MD 细胞凋亡早期荧光检测试剂盒
用于检测细胞早期凋亡;一步法、均相检测活细胞内 GSH 水平。

美谷分子MD 细胞凋亡早期荧光检测试剂盒

本试剂盒可使用荧光微孔读板机来针对哺乳动物中活细胞的谷胱甘肽含量的测定,检测早期细胞凋亡事件。谷胱甘肽是哺乳动物细胞中的一种重要抗氧化剂,由于谷胱甘肽流出,细胞内谷胱甘肽 (GSH) 减少导致早期发生的线粒体相关细胞凋亡。本试剂盒使用单氯二胺 (MCB) 检测细胞凋亡事件中的细胞 GSH 水平,MCB 是一种具有 GSH 高亲和性的细胞渗透性染料。未反应染料几乎都是非荧光的。染料与 GSH 反应之后,通过内源性谷胱甘肽硫转移酶 (GST) 催化,此染料为蓝色荧光,其中激发波长 394nm,发射波长 490nm。检测发出的荧光信号强度可反应细胞中 GSH 的含量

早期细胞凋亡分析,测定细胞内氧化还原状态的变化,用于胚胎发育、癌症及神经退行性疾病等研究。

试剂盒原理:Caspase家族在介导细胞凋亡的过程中起着非常重要的作用,其中caspase-3为关键的执行分子,它在凋亡信号传导的许多途径中发挥功能。Caspase-3正常以酶原(32KD)的形式存在于胞浆中,在凋亡的早期阶段,它被激活。活化的Caspase-3能够特异切割底物DEVD-NucView 488。根据这一特点,Biotium 将一段带有大量负电荷的DEVD肽连接到一种能和DNA结合的染料上。底物本身不能产生荧光,但是这种底物可以快速的穿过细胞膜进入细胞质并在这里被活化的Caspase-3剪切,从而释放出和DNA有高亲和力的染料,释放出来的染料迁移进入细胞核并把细胞核染成亮绿色。根据释放的荧光强度的大小,可以测定caspase-3的活性,从而反映Caspase-3被活化的程度。从这里我们可以得出:这个荧光底物不同于传统的底物,它实现活细胞 Caspase-3 活性检测的同时染色细胞核DNA,具有典型的双功能性。线粒体跨膜电位的降低是细胞凋亡早期的不可逆事件,引起一系列线粒体相关变化。MitoViewTM 633是一种远红外线粒体荧光染料(一种亲脂性阳离子化合物),在正常细胞中依据线粒体膜电位(外正内负)的存在,逐渐扩散进质膜并沉积在线粒体内,在激发光下放出荧光,可以非常方便地使用荧光显微镜或激光共聚焦显微镜来观察线粒体的形态和移动的变化情形。例如下图,活的Hela细胞用MitoViewTM  633染色结果



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