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看完它,你就知道无血清细胞冻存液是什么了!

发布时间:2021-05-27   点击次数:80次
  伴随着科技进步持续的发展趋势,医学技术也在持续提高。前两年冷冻人的恶性事件让全球眼前一亮,原先不仅是食材能够冷藏储存,就连身体也可以冷藏储存。假如要想做到那样的目地,那麼就需要体细胞冷冻液,这类东西如何配备呢?下边就来实际的了解一下,wako BAMBANKER无血清细胞冻存液的秘方是啥?
 
  细胞冻存:
  1、配置含10%DMSO或凡士林、10~20%小牛血清的冻存细胞培养液;
  2、取对数成长期的体细胞,除去旧细胞培养液,用PBS清理;
  3、除去PBS,添加适量蛋白酶(遮盖细胞培养皿表层)把单面生长发育的体细胞消化吸收出来;
  4、抽滤1000rpm,5min;
  5、除去蛋白酶,添加适量配置好的冻存细胞培养液,用塑料吸管轻轻地吹打使体细胞匀称,记数,调整冻存液中体细胞的最后相对密度为5牙周106/ml~1牙周107/ml;
  6、将体细胞分装进冻存管中,每管1~1.5 ml;
  7、在冻存管上标出体细胞的名字,冻存時间及作业者;
  8、冻存:标准的冻存程序流程为减温速度-1~-2℃/min;当溫度达-25℃下列时,可升至-5℃~-10℃/min;到-100℃时,则可快速渗入液态氮中。也可将配有体细胞的冻存管放进-20℃电冰箱2h,随后放进-70℃电冰箱中留宿,取下冻存管,移进液氮容器内。
  
  细胞复苏:
  1、从液氮容器中取下冻存管,立即渗入37℃温开水中,并时常摇晃令其尽早溶化;
  2、从37℃水浴中取下冻存管,开启外盖,用塑料吸管吸出来体细胞悬液,加到离心管并滴加10倍以上细胞培养液,搅拌;
  3、抽滤,1000rpm,5min;
  4、弃去上清液,添加含10%小牛血清细胞培养液重悬体细胞,记数,调节体细胞相对密度,打疫苗塑造瓶,37℃恒温箱静放塑造;
  5、隔日拆换一次细胞培养液,再次塑造。
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